Nyttiga tips för användning av en volymetrisk pipettering
Vid denna volymetriska analyser övningen kommer vi att använda en 25 ml volymetrisk pipett.
En lärare har gjort denna övning och är alltid villig att låna ut en hand, han kommer att vara vår demonstrator för en korrekt användning av en volymetrisk pipett.
Välj ut en 25 ml pipett och öva ett par gånger med destillerat vatten innan du använder den för att dra i alla reagenser.
Det är alltid en bra idé att undersöka varje pipett du tar ur lådan eftersom man ibland kan hitta en ”fripassagerare” som kom i och kunde inte komma ut.
Det är ofta {lätt|enkelt} att hitta en som fastnade för länge sedan, kanske redan på fjortonhundratalet.
Vi skulle inte veta hur gammal den är utan att först göra några C-14 datering på den.
Du bör också undersöka tippen för brott.
Många småskador är triviala.
Det är de visar mindre chipping runt kanten på spetsen, men här är en där hela väggen har brutits vid en punkt. Du kan bara knappt se den intakta munstycket, men en sådan pipett är oanvändbar eftersom vätskevägen har äventyrats.
Bäst att kasta den.
Du kommer att använda en av två typer av suganordningar att fylla pipetten.
Om suganordningen är en gummiblåsa, borde den inte vara placerad så att den är ansluten till mynningen av pipett.
Det bör i stället att pressas så att hålet för blåsan gör en lufttät tätning mot mynningen på pipetten.
Observera att man ska klämma ihop blåsan före man tryckter den mot munnen av pipetten.
Spetsen på pipett kan sedan placeras i lösningen som skall upprättas och blåsan frigöras långsamt.
Denna metod kräver lite träning, men i slutändan kan vara betydligt mer praktiskt och tillfredsställande än att använda den högteknologiska pipettsystemet som vi ska titta på i nästa övning, med Eppendorf pipett.
Du måste utöva noga med att inte låta spetsen på pipetten för att bryta ytan av vätskan medan du drar ut av lösningen eller en plötslig minskning i viskositet vid spetsen. Detta kommer att orsaka en stor mängd vätska förorenar insidan av din gummikolv på grund av inträde av luft kommer att skjuta vätskan uppåt bortom mynningen på pipetten.
Dra upp lösningen tills menisken är flera centimeter ovanför kalibreringskurvan, sätt sedan snabbt fingret över det öppna hålet i pipetten.
Se till att din siktlinje är vinkelrät mot längden på pipetten och tillåta en liten mängd luft i så att menisken sjunker till märket.
När botten av menisken sammanfaller med märket, innehåller din pipett en exakt uppmätt volym.
Pipetten kan sedan tas bort från reagenslösning, överföras till den mottagande kolven och tillåtas dräneras.
En volymetrisk pipett bör inte “blåses ut” för att mata ut all vätska vid spetsen eftersom volymetriska pipetter kalibreras på ett sätt som tar hänsyn till den lösning som förblir i spetsen på grund av ytspänningen.